Solis BioDyneDNA聚合酶的應(yīng)用

超低溫保存箱、液氮真空軟管E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA損傷修復(fù)，在半保留復(fù)制中起輔助的作用。DNA polⅡ在修復(fù)損傷中也具有重要的作用。DNA polⅢ是一種多亞基的蛋白質(zhì)，在DNA新鏈的從頭合成中起復(fù)制酶的作用。

復(fù)制的忠實(shí)性問題會(huì)影響到翻譯的**性，這種忠實(shí)性主要依賴于堿基的特異性配對(duì)。據(jù)估計(jì)每個(gè)堿基對(duì)將有10-3。的概率會(huì)發(fā)生錯(cuò)配，但實(shí)際的錯(cuò)配率只有10-8~10-10，即每1000個(gè)細(xì)菌復(fù)制周期中，每個(gè)基因組只產(chǎn)生一次錯(cuò)誤。Solis BioDyneDNA聚合酶能增加互補(bǔ)堿基的特異性，該特異性主要表現(xiàn)在以下兩方面：

①能夠檢查進(jìn)入的堿基是否和模板互補(bǔ)，這時(shí)通過(guò)一個(gè)匹配的化學(xué)特點(diǎn)加以識(shí)別，這是合成前的一種預(yù)防措施，稱為合成前( presynthetic)錯(cuò)誤控制；

②在新的堿基加到鏈上以后，檢查堿基是否配對(duì)。若發(fā)生錯(cuò)配，將會(huì)把剛加上去的錯(cuò)誤堿基切除掉，這是校正控制( proofreading)。

細(xì)菌的三種DNA聚合酶都具有3 7硝’外切活性，逆DNA合成方向進(jìn)行加工，提供校對(duì)功能。在鏈的延伸階段中，一個(gè)核苷酸進(jìn)人生長(zhǎng)鏈的末端，形成鍵，該酶就向前移一個(gè)堿基對(duì)，準(zhǔn)備下一個(gè)堿基對(duì)的進(jìn)入。若一個(gè)錯(cuò)誤產(chǎn)生了，這個(gè)酶就向回退，切除*后加進(jìn)來(lái)的這個(gè)堿基，產(chǎn)生一個(gè)位點(diǎn)，然后被正確的堿基取代。

不同DNA多聚酶聚合和校正之間的關(guān)系是不同的。有時(shí)，這些活性是由相同的蛋白質(zhì)亞基產(chǎn)生的，但有時(shí)它們又還有不同的亞基。一個(gè)錯(cuò)誤堿基的排除實(shí)際上是十分復(fù)雜的，因?yàn)檫@種切除反應(yīng)是由不同位點(diǎn)催化的。

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