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BHK-21倉(cāng)鼠腎細(xì)胞
貨號(hào):BY-0693
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
目錄價(jià):詢價(jià)
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BHK-21(Baby Hamster Kidney-21)倉(cāng)鼠腎細(xì)胞是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中常用的貼壁型細(xì)胞系,因其易于培養(yǎng)、增殖能力強(qiáng)及廣泛的適用性,在病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)、基因工程等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。以下從細(xì)胞來(lái)源、特性、培養(yǎng)方法及應(yīng)用場(chǎng)景等方面展開詳細(xì)介紹:

一、細(xì)胞來(lái)源與歷史背景

BHK-21 細(xì)胞系源自 1961 年,由 Macpherson 和 Stoker 從新生敘利亞倉(cāng)鼠的腎臟組織中分離建立,*初為成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞。該細(xì)胞系在傳代過(guò)程中經(jīng)歷了多次克隆化篩選,其中*常用的亞克隆是BHK-21 C13(第 13 次克?。?,具有穩(wěn)定的二倍體核型(2n=44),但在長(zhǎng)期傳代后可能逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)楫惐扼w。因其生長(zhǎng)特性優(yōu)良,BHK-21 成為全球?qū)嶒?yàn)室廣泛使用的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系之一。

二、生物學(xué)特性

  1. 形態(tài)與生長(zhǎng)特性
    BHK-21 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈梭形或成纖維細(xì)胞樣,細(xì)胞輪廓清晰,貼壁能力強(qiáng),可在培養(yǎng)瓶表面形成均勻單層。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞倍增時(shí)間約為 12–24 小時(shí),增殖速度快,適合大規(guī)模培養(yǎng)。
  2. 分子與功能特征
    • 病毒易感性:對(duì)多種病毒(如痘苗病毒、單純皰疹病毒、副流感病毒等)高度敏感,是研究病毒復(fù)制機(jī)制和制備病毒疫苗的理想模型。
    • 轉(zhuǎn)染效率高:易于通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔等方法導(dǎo)入外源基因,常用于重組蛋白表達(dá)和基因功能研究。
    • **性:作為非腫瘤源性細(xì)胞系,BHK-21 在疫苗生產(chǎn)中具有較低的致瘤性風(fēng)險(xiǎn),符合生物制品**性要求。

三、培養(yǎng)方法與條件

  1. 培養(yǎng)基與營(yíng)養(yǎng)需求
    常用培養(yǎng)基為MEM(Minimum Essential Medium)DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium),需添加 10%–15% 胎牛血清(FBS)提供生長(zhǎng)因子,同時(shí)補(bǔ)充 1% 雙抗(青霉素 / 鏈霉素)防止污染。pH 值需維持在 7.2–7.4,滲透壓控制在 280–320 mOsm/kg。
  2. 培養(yǎng)環(huán)境
    細(xì)胞需在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),濕度保持在 95% 以上。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80%–90% 時(shí),需進(jìn)行傳代:用 0.25% 胰酶 - EDTA 消化液處理,輕柔吹打后按 1:3–1:5 比例接種至新培養(yǎng)瓶。
  3. 凍存與復(fù)蘇
    凍存液采用 “90% FBS+10% DMSO”,細(xì)胞密度調(diào)整為 1×10?–5×10? cells/mL,經(jīng)程序降溫(-80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮)長(zhǎng)期保存。復(fù)蘇時(shí)需快速解凍(37℃水?。?,離心去除凍存液后更換新鮮培養(yǎng)基,以減少 DMSO 對(duì)細(xì)胞的毒性。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 病毒學(xué)研究與疫苗生產(chǎn)
    • 病毒增殖:BHK-21 是生產(chǎn)獸用疫苗(如口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗)的核心細(xì)胞系,因其高效支持病毒復(fù)制且易于大規(guī)模培養(yǎng)。
    • 病毒載體構(gòu)建:用于制備腺病毒、慢病毒等基因治療載體,或研究病毒與宿主細(xì)胞的相互作用機(jī)制。
  2. 重組蛋白表達(dá)
    通過(guò)基因工程改造,BHK-21 可高效表達(dá)外源蛋白(如細(xì)胞因子、受體蛋白),尤其適用于需要翻譯后修飾的復(fù)雜蛋白生產(chǎn),部分重組蛋白已應(yīng)用于生物制藥領(lǐng)域。
  3. 藥物毒性與細(xì)胞生物學(xué)研究
    • 作為體外模型評(píng)估藥物對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的毒性作用,檢測(cè)細(xì)胞形態(tài)、增殖率或凋亡指標(biāo)。
    • 用于研究細(xì)胞信號(hào)通路、細(xì)胞黏附機(jī)制及細(xì)胞周期調(diào)控等基礎(chǔ)生物學(xué)問(wèn)題。
  4. 生物制品質(zhì)量控制
    在疫苗和重組蛋白生產(chǎn)中,BHK-21 可用于病毒滴度測(cè)定、外源因子檢測(cè)等質(zhì)量控制環(huán)節(jié),確保產(chǎn)品**性與有效性。

五、注意事項(xiàng)

  • 細(xì)胞污染監(jiān)測(cè):定期檢查細(xì)胞形態(tài)及培養(yǎng)基狀態(tài),避免細(xì)菌、真菌或支原體污染(可通過(guò) PCR 或熒光染色檢測(cè))。
  • 傳代次數(shù)控制:長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞特性改變(如核型異常),建議使用低代次細(xì)胞(<20 代)進(jìn)行關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)。
  • **性操作:涉及病毒培養(yǎng)時(shí),需在生物**柜中操作,并遵循相應(yīng)等級(jí)的實(shí)驗(yàn)室**規(guī)范。

總結(jié)

BHK-21 倉(cāng)鼠腎細(xì)胞憑借其易培養(yǎng)、高增殖活性和多功能性,成為生命科學(xué)領(lǐng)域的 “萬(wàn)能細(xì)胞工具”。從疫苗工業(yè)化生產(chǎn)到前沿基因治療研究,其應(yīng)用覆蓋了生物醫(yī)學(xué)的多個(gè)維度,未來(lái)在細(xì)胞治療與再生醫(yī)學(xué)中仍將發(fā)揮不可替代的作用。


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