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CHO/dhFr-中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型
貨號(hào):BY-1294
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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CHO/dhFr - 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型簡(jiǎn)介
CHO/dhFr - 細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)的特殊突變株,因缺乏二氫葉酸還原酶(DHFR)活性而得名。DHFR 是葉酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶,參與四氫葉酸的合成,而該細(xì)胞系由于 DHFR 基因缺陷,無(wú)法在不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中存活,這一特性使其成為基因工程和生物制藥領(lǐng)域的重要工具。
從生物學(xué)特性來(lái)看,CHO/dhFr - 細(xì)胞保留了 CHO 細(xì)胞的基本形態(tài)與生長(zhǎng)特征,呈上皮樣貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形。在適宜條件下,細(xì)胞增殖能力較強(qiáng),倍增時(shí)間約為 18 - 24 小時(shí),可穩(wěn)定傳代,適合大規(guī)模培養(yǎng)。與野生型 CHO 細(xì)胞相比,其*顯著的差異在于 DHFR 缺陷,這一特性使得該細(xì)胞在篩選和擴(kuò)增外源基因時(shí)具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。
在培養(yǎng)和基因工程操作方面,CHO/dhFr - 細(xì)胞需要在添加了次黃嘌呤和胸腺嘧啶(HT)的培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)。當(dāng)利用該細(xì)胞進(jìn)行基因表達(dá)研究時(shí),通常將編碼 DHFR 的基因與目的基因共同構(gòu)建到表達(dá)載體中,轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,將細(xì)胞置于不含 HT 但含有甲氨蝶呤(MTX)的培養(yǎng)基中篩選。MTX 是 DHFR 的強(qiáng)抑制劑,普通細(xì)胞會(huì)因 MTX 抑制 DHFR 活性而死亡,而成功轉(zhuǎn)入 DHFR 基因和目的基因的細(xì)胞則能夠在這種培養(yǎng)基中存活并大量增殖,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的基因陽(yáng)性克隆的高效篩選。同時(shí),逐步提高 MTX 濃度,可促使細(xì)胞內(nèi)整合的表達(dá)載體拷貝數(shù)增加,進(jìn)而顯著提高目的蛋白的表達(dá)水平。
在應(yīng)用領(lǐng)域,CHO/dhFr - 細(xì)胞發(fā)揮著重要作用。在生物制藥行業(yè),它是生產(chǎn)重組蛋白藥物的理想宿主細(xì)胞。全球眾多上市的治療性單克隆抗體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)激素等生物藥均采用該細(xì)胞系生產(chǎn),如治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的阿達(dá)木單抗等。由于其能夠?qū)Ρ磉_(dá)的蛋白進(jìn)行正確的折疊、糖基化等翻譯后修飾,生產(chǎn)出的重組蛋白藥物具有與天然蛋白相似的結(jié)構(gòu)和功能,且**性高、免疫原性低。此外,在基礎(chǔ)科研中,CHO/dhFr - 細(xì)胞也常用于研究基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制、蛋白質(zhì)功能及細(xì)胞信號(hào)通路等,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供了重要的細(xì)胞模型。

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