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煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA
貨號(hào):煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
品牌:其它品牌
規(guī)格:
目錄價(jià):詢價(jià)
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煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸操作步驟 :
1. 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照(標(biāo)準(zhǔn)品)50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7. 溫育:重復(fù)操作同 3。
8. 洗滌:重復(fù)操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑 B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘
10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色) 。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值) 。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測(cè)樣本的種類(lèi):除試劑盒特別說(shuō)明外,一般不同種屬不能通用。常見(jiàn)待測(cè)樣本種類(lèi)有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;


關(guān)鍵字:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,試劑盒的檢測(cè)范圍:也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測(cè)樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對(duì)于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測(cè)定樣本。

 

關(guān)鍵字:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,試劑盒中的稀釋線性及回收率:
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來(lái),看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的佳稀釋倍數(shù);
b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況,加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測(cè)定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測(cè)定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測(cè)樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;


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關(guān)鍵字:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,試劑盒的其它指標(biāo):
a.靈敏度:試劑盒能夠檢測(cè)到的樣本低濃度的能力,如果待檢指標(biāo)含量很低,需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;
b.板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%):反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻,CV%一般小于10% 比較好。
試劑盒的有效期:試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準(zhǔn)備時(shí)間需要考慮到試劑盒的有效期。

 

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關(guān)鍵字:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 用于體外診斷。試劑盒用于檢測(cè)與人體組織或細(xì)胞標(biāo)本。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 適用范圍為冰凍切片和石蠟包埋組織切片,新準(zhǔn)備好的細(xì)胞,和固定的培養(yǎng)細(xì)胞。歡迎咨詢我司自產(chǎn)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 。


(編輯:tanxi)
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